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實驗6-抗病毒感染-
2023-04-10
甘草多糖免疫學(xué)實驗研究解讀（六）
甘草多糖抗病毒感染實驗
于長水
甘草多糖提純后，成為非特異免疫原性新物質(zhì)。在研發(fā)過程中，在投入市場應(yīng)用前，在動物中實驗觀察了甘草多糖抗病毒作用。
實驗由天津醫(yī)科大學(xué)微生物教研室進行。
實驗材料與方法：
由于病毒只能在活的細胞內(nèi)生長，選用小鼠傳代纖維母細胞培養(yǎng)病毒。
病毒則以呼吸道病毒——腺病毒，腸道病毒——柯薩奇病毒做實驗。
每種病毒分四個組，甘草多糖分為1:4、1:8、1:16、1:32四個稀釋度，稀釋度越高，含甘草多糖量越低。
- 甘草多糖對細胞毒性測定
病毒在組織細胞生長對照
甘草多糖是否對細胞具有毒性，細胞是否適于病毒生長，都應(yīng)該先做預(yù)試驗，以保證正式實驗結(jié)果的可靠性。
在細胞液中加入不同稀釋度甘草多糖，培養(yǎng)48小時后觀察，結(jié)果細胞形態(tài)正常均無變化。
病毒在細胞液中生長良好，均出現(xiàn)細胞病變。
結(jié)果解讀：
表一、甘草多糖對細胞的毒性作用測定、病毒在細胞中生長對照
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實驗組 細胞對照 病毒對照 |
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1:4 —— —— ++++ 1:8 —— —— ++++ 1:16 —— —— ++++ 1:32 —— —— ++++ |
從表一可明顯看出，甘草多糖不同稀釋度溶液對細胞均無毒性。對照病毒生長良好，細胞適宜病毒生長。
據(jù)此，可進行正式實驗。
- 分組實驗
1組：在細胞中，先加入不同稀釋度甘草多糖液，24小時后吸出甘草多糖液，加入病毒液。
2組：在細胞中，先加入病毒液，1小時后，洗去病毒液，加入不同稀釋度甘草多糖液。
3組：不同稀釋度甘草多糖液與病毒液同時加入細胞液中。
4組：不同稀釋度甘草多糖液與病毒液混合，放置37℃培養(yǎng)2小時后，再加入細胞液中。
相同的分組與相同的方法，分別對腺病毒、柯薩奇病毒做了實驗觀察。
表二、甘草多糖對腺病毒感染保護率（%）
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1:4 1:8 1:16 1:32 病毒對照 甘草多糖對照 細胞對照 |
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1 67.5 64.9 70.3 74.5 ++++ —— —— 2 14 5.3 6.0 10.0 ++++ —— —— 3 60 49.4 48.9 42.5 ++++ —— —— 4 45.3 43.5 49.6 47.4 ++++ —— —— |
表三、甘草多糖對柯薩奇病毒感染保護率（%）
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1:4 1:8 1:16 1:32 病毒對照 甘草多糖對照 細胞對照 |
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1 55.5 64.5 57.6 59.0 ++++ —— —— 2 50.0 43.4 45.2 39.1 ++++ —— —— 3 42.5 39.3 35.4 43.9 ++++ —— —— 4 47.7 40.9 47.7 42.6 ++++ —— —— |
從表二、表三可看出，甘草多糖對腺病毒、柯薩奇病毒均有阻止病毒進入細胞造成感染的功能作用。
還觀察到，甘草多糖對這兩種病毒均有直接的滅活作用（即殺滅病毒）。
呼吸道病毒和腸道病毒，都是經(jīng)常感染人的致病病毒，而且對于病毒目前還缺乏理想的高效治療藥物。
腺病毒是一群多型的病毒，主要經(jīng)上呼吸道侵入人體，也可經(jīng)眼結(jié)膜侵入，引起的疾病包括：急性上呼吸道感染、急性喉炎、咽結(jié)膜熱、流行性角膜結(jié)膜炎、非典型肺炎等癥。侵犯兒童和中老年人。
柯薩奇病毒是一群多型的病毒，主要通過腸道感染，可引起無菌性腦膜炎、流行性胸痛、夏季感冒、咽峽炎、心肌炎、麻痹癥等。這群病毒對外環(huán)境的抵抗力較強。
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